Un livre de cuisine de laboratoire complet pour créer des protéines modifiées par glucides pour des applications thérapeutiques

Génie glycosylation de biophar-maceuticals: Méthodes et protocoles Edité par Alain Beck est un manuel complet, étape par étape, pour créer et caractériser des protéines thérapeutiques, en particulier, des anticorps monoclonaux , avec des modifications de glucides. Le livre, publié sous l’égide de la série Springer Protocols, est divisé en 4 sections:

“ Glycoingénierie des protéines thérapeutiques ” se concentrer sur la production de versions glycosylées adaptées d’anticorps monoclonaux en tant que protéines thérapeutiques. “ Glycoanalytics ” en se concentrant sur la caractérisation analytique impliquant des méthodes comme la spectroscopie de masse et la séparation chromatographique pour identifier et profiler les signatures des protéines glycosylées. “ Caractérisation du complexe glycoprotéique ” en se concentrant sur les méthodes analytiques pour la cartographie des épitopes et les complexes Ag-Ab. “ les tests PK / PD pour les anticorps thérapeutiques ” en se concentrant sur des dosages pour mesurer des lectures de pouvoir pharmacologique spécifiques pour des agents thérapeutiques glycosylés.

Il ressort du contenu que le livre se veut un manuel de référence de protocoles et de bonnes pratiques pour le praticien de banc. Les auteurs font un travail merveilleux en couvrant une grande variété d’outils et de techniques et en les réunissant en un seul volume. Alors que des livres ont déjà été écrits sur la chimie de la glycosylation (voir le manuel d’Alexei Demchenko sur la glycosylation chimique), et la biologie de la glycosylation des protéines (voir la Glycosylation des protéines de Rosalyn Bill, en particulier sur la purification, la fonction et la cinétique). des enzymes de glycosylation sélectionnées et la fonction in vivo des protéines glycosylées), ce volume est la première collection complète de COMMENT synthétiser glycoprotéines dans le laboratoire. L’organisation des chapitres dans le livre a un flux logique avec une introduction qui met le lecteur en place pour apprécier les questions saillantes impliquées dans le protocole décrit par la suite. Ces sections sont suivies par celles sur l’interprétation des données et des artefacts et se terminant par des notes et des références à la littérature primaire. L’introduction va dans le POURQUOI des expériences, c’est-à-dire la justification du protocole expérimental mais suppose la connaissance du contexte scientifique. Par conséquent, le lecteur non initié peut avoir à se référer à un manuel standard ou à examiner des documents pour saisir des détails plus fins. Ce n’est pas une lacune du livre, car le public visé devrait être raisonnablement familier avec les bases de la biologie et de la chimie des glycoprotéines avant d’essayer de travailler en laboratoire. Je crois que ces descriptions devraient avoir des contours schématiques de stratégie expérimentale, des informations suffisantes qui mettent en place l’esprit d’expérimentateurs pour mener à bien l’expérience et interpréter les résultats, positifs ou négatifs, avec une rigueur scientifique appropriée. Dans ce contexte, j’ai trouvé la description de la justification scientifique la plus complète décrite dans les chapitres 4, 5, 6 et 18. D’autres chapitres les ont aussi, mais ces chapitres se distinguent par la clarté et la représentation de la logique expérimentale. de la connaissance théorique dans l’espace de glycol-biologie. Les protocoles vont dans le HOW des expériences. Ils sont très bien organisés et complets. Ils fournissent une recette étape par étape pour effectuer une expérience ou un processus analytique. Je pense n’avoir testé aucun des protocoles en laboratoire, je crois en les lisant qu’ils sont assez complets. En fin de compte, si un expérimentateur raisonnablement capable est capable de réaliser une expérience pour la première fois en utilisant un protocole, il est considéré comme un test complet. Grâce à ce filtre, je crois que quelqu’un qui souhaite comparer un processus ou en établir un pour la première fois bénéficiera des descriptions contenues dans le protocole. Ils vont plus loin que ce que l’on peut extraire des sections Matériels et méthodes des articles publiés et, espérons-le, intégrer certaines des meilleures pratiques issues des auteurs des chapitres respectifs. La section sur l’interprétation des données n’est pas explicitée dans chaque chapitre , mais parfois incorporé dans la section de stratégie expérimentale (par exemple, le chapitre 5) ou suit parfois la description des protocoles expérimentaux (par exemple Chapitres 7, 9 et 19). Un expérimentateur qui tente une nouvelle technique pour la première fois trouvera cette section particulièrement éclairante parce qu’il peut former une image mentale de ce à quoi les données ressembleront et comment elles peuvent être interprétées. La section des notes est essentiellement une feuille de triche , une compilation des meilleures pratiques expérimentales. Je crois que c’est un aspect absolument critique de chaque chapitre parce qu’un expérimentateur sans expérience (comme les auteurs) ne comprendra pas nécessairement le “ sentir ” de l’expérience sans ces meilleures pratiques. Enfin, chaque chapitre a une section sur la littérature primaire. Une lacune dans ceci est le manque de “ loop-back ” au protocole ou à la section des notes. Ce que j’aurais beaucoup apprécié, c’est une forme de renvoi aux notes ou à la section scientifique rationnelle / introduction. De cette manière, un expérimentateur expérimenté aurait pu revenir à la référence originale de manière ciblée, si nécessaire. Ce qui m’a paru particulièrement pertinent, c’est la focalisation sur les anticorps monoclonaux comme substrat de glycosylation, créant ainsi des méthodes thérapeutiques pertinentes. Les AcM Glycoengineered ont acquis une importance croissante dans le monde des médicaments ciblés, en particulier contre le cancer. Des modèles de glycosylation définis renforcent les propriétés pharmacologiques des MAb.Il a déjà produit du Mogamulizumab pour l’indication réfractaire des leucémies et lymphomes T adultes (Anti-CCR4, approuvé au Japon, commercial sous le nom commercial Poteligio) et il y a au moins 16 autres AcM glycolés dans le pipeline clinique incluant l’Obinutuzumab le plus avancé. programme de Roche (Phase-III, IgG1 humanisée anti-CD20). Les indications de maladie pour lesquelles ces MAb Glyco sont évaluées incluent principalement des tumeurs malignes hématologiques et des tumeurs solides dans l’espace oncologique, mais aussi des maladies avec des mécanismes cibles immunomodulateurs (par exemple, l’asthme). Cette collection de protocoles rencontrera des expérimentateurs dans l’industrie biopharmaceutique ainsi que dans divers laboratoires académiques. Les organismes de recherche sous contrat, en particulier ceux qui se concentrent sur les services d’analyse ou de synthèse, bénéficieront également des protocoles décrits. Enfin, les lecteurs doivent toujours se rendre compte qu’ils lisent sous forme de livre, des protocoles qui évoluent constamment spondylarthrite. De nouvelles techniques, matériaux et méthodes sont publiés chaque jour qui améliorent ou modifient radicalement la façon dont nous faisons les choses. Les compilations sur protocoles sont donc, par définition, constamment mises à jour. Les éditeurs et les auteurs peuvent donc fournir une ressource en ligne de secours en complément du volume de bureau à utiliser par les praticiens. En l’absence de cela, la durée de conservation d’un livre de protocoles est courte. J’espère que les éditeurs et les auteurs en sont conscients. Dans l’ensemble, je recommande fortement ce livre et conseille aux auteurs et aux éditeurs d’aspirer à devenir le manuel # “ Maniatis ” de la glycobiologie des anticorps.