Vaginite due à Candida krusei: épidémiologie, aspects cliniques et thérapie

Douze femmes présentant une infection vaginale à Candida krusei ont été évaluées. Des tests de sensibilité antifongique in vitro et un typage moléculaire ont été effectués. Les patients infectés par C krusei présentaient souvent des signes vulvovaginaux réfractaires et des symptômes qui étaient autrement indiscernables de la vaginite due à d’autres levures. Le clotrimazole était l’in vitro le plus actif, avec une concentration inhibitrice minimale de% μg / mL. Quatre des patients traités avec l’acide borique avaient une guérison clinique et mycologique. Deux génotypes dominants de C krusei ont été identifiés par l’intermédiaire de plusieurs agents antimycotiques. Aucune modification génotypique majeure n’a été observée dans les isolats successifs du même patient dans la plupart des cas, suggérant que ces cas réfractaires étaient des rechutes C krusei est une cause rare mais importante de vaginite réfractaire et est unique en raison de sa résistance intrinsèque fluco nazole

La candidose vulvo-vaginale est l’une des infections les plus courantes des voies génitales féminines. La plupart des cas% -% sont causés par Candida albicans , alors que les espèces non-albicans de Candida représentent seulement% -% des cas. avec des espèces non albicans de Candida sont dues à Candida glabrata% -% des cas ou Candida tropicalis &%;% des cas Candida krusei est une cause inhabituelle de vaginite fongique En fait, plusieurs chercheurs se sont demandé si C krusei est un vrai pathogène vaginal Nous présentons les résultats d’une étude sur des patients atteints de krusei vaginitis L’analyse comprenait un examen approfondi des dossiers et des tests de sensibilité antifongique in vitro des isolats vaginaux de C krusei, dont les résultats ont été comparés aux résultats du test de sensibilité non vaginale. C krusei isolates En outre, l’évaluation des résultats du traitement et l’analyse moléculaire ont été réalisées

Patients et méthodes

Patients et souches de levure La clinique de vaginite de la Wayne State University de Detroit a été créée pour évaluer les symptômes de vaginite chronique. Il y a des visites de patients par an, y compris une moyenne de nouveaux patients par an. krusei dans leurs sécrétions vaginales Ces femmes avaient un total de C krusei isolats Dix cartes étaient disponibles pour l’examen, et les patients avaient subi un suivi completCandida vaginite a été définie comme la présence de symptômes vulvo-vaginaux décharge, prurit, douleur et brûlure et signe érythème, l’œdème et l’excoriation de l’inflammation chez les patients pour lesquels la résolution de ces symptômes et signes était accompagnée de l’obtention de cultures négatives pour les espèces Candida suivant un traitement antimycosique. En outre, les autres causes de vaginite, la vaginose bactérienne et la trichomonase ont été exclues. l’histoire a été obtenue, un examen bimanuel avec Des prélèvements sur écouvillon ont été effectués pour analyse en laboratoire. Tous les patients ont reçu un traitement et un suivi à long terme a été effectué pour évaluer la réponse à la thérapie. Les procédures de laboratoire ont été analysées pour le pH et les amines. En outre, des écouvillons vaginaux ont été immédiatement inoculés sur des plaques de gélose Sabouraud dextrose et incubés à ° C pendant h. Des cultures positives pour la levure ont été évaluées pour la formation de germes et de chlamydospores. Tous les isolats de levure ont été testés. identifiée au niveau de l’espèce avec l’API C Kit d’identification des levures bioMérieux Tous les isolats de Candida frais ont été stockés dans du lait décimal à-° C en attendant les tests de sensibilité et la délimitation des souches moléculaires à une date ultérieure.Analyse de sensibilité antifongique in vitro Trente-quatre isolats de C krusei, vaginal et non vaginale, ont été évalués par la méthode de microdilution en bouillon selon le Normes de laboratoire clinique Normes NCCLS MA Les agents antifongiques testés comprenaient le clotrimazole, le miconazole, le fluconazole, le voriconazole, l’itraconazole, l’acétate de caspofungine et l’amphotéricine B. AmB La CMI pour AmB était définie comme la concentration de médicament la plus faible empêchant toute croissance discernable. les antifongiques étaient définis comme la concentration la plus faible qui inhibait la croissance de% telle que détectée visuellement; ce résultat a été confirmé en diluant mL de milieu de croissance témoin sans médicament avec mL de milieu pour produire un étalon% d’inhibition, conformément aux lignes directrices NCCLSCariophylographie électrophorétique Délimitation des souches, ie, le génotypage a été effectué par électrophorèse électrophorétique CHEF électrophorèse homogène sur l’ADN chromosomique intact, préparé comme décrit ailleurs Les photographies de gels colorés ont été examinées visuellement Un isolat était considéré comme une souche différente s’il y avait une différence de position ou de nombre de bandes A Une différence de bande unique était utilisée pour délimiter les génotypes , parce qu’une différence de bande unique entre les profils de gel CHEF pour les isolats de Candida contrairement aux procaryotes signifie une variation de taille importante et détectable des bandes chromosomiques Tous les gels ont été analysés en double pour assurer la reproductibilité, comme démontré ailleurs

Résultats

Les symptômes vulvovaginaux chroniques étaient présents pour tous les patients, bien que les symptômes et les signes individuels étaient indiscernables de la vaginite due à d’autres levures Les âges des patients variaient de à des années, avec un âge moyen de sept ans. exposition récente à des médicaments antifongiques, y compris le fluconazole pour les patients Dans les échantillons provenant des patients, seules les blastospores en levure en levure ont été observées; Des patients ont eu une culture mixte avec C krusei et Candida glabrata Trois des patients avaient différentes espèces de Candida récupérées au cours du suivi. Les autres espèces de Candida récupérées au cours du suivi comprenaient C albicans, C tropicalis, C glabrata, et C guilliermondii Analyse de sensibilité in vitro Le clotrimazole était l’azole le plus actif, avec une CMI de μg / mL et une CMI de μg / mL La CMI de la caspofungine, du voriconazole, de l’itraconazole et de l’AmB était de μg / mL La CMI du fluconazole était μg / mL, et le MIC était & gt; μg / mL La CMI du miconazole était de μg / mL et la CMI était de μg / mL. Il n’y avait pas de différence significative dans les CMI déterminées pour les isolats vaginaux et non vaginaux. Tableau montre la comparaison entre la CMI de divers antifongiques pour isolats vaginaux de C albicans et C krusei, ce qui souligne que les antifongiques avaient des CMI plus élevés pour C krusei

Tableau View largeTélécharger la lameComparaison des susceptibilités in vitro de Candida krusei et Candida albicans isolats vaginauxTable Agrandir la photoTélécharger la comparaisonComportement des susceptibilités in vitro des isolats vaginaux Candida krusei et Candida albicansRésultats du traitement Le tableau montre les résultats du traitement Au total, des traitements ont été administrés aux patients. Chez ces patients, des traitements prolongés de la durée du traitement par le clotrimazole, administrés par voie topique, ont été administrés à des patients pendant des semaines; Le traitement par kétoconazole a été couronné de succès chez les patients. La flucytosine administrée par voie topique, suivie d’un traitement d’entretien par la nystatine topique, a permis de guérir les patients. patient

Tableau View largeTélécharger slideUn traitement antifongique et les résultats pour les patients atteints de vaginite Candida kruseiTable View largeTélécharger slideUn traitement antifongique et les résultats pour les patients atteints de Candida krusei vaginiteEn général, la durée du traitement pour tous les patients variait de jours à semaines médiane, semaines La durée de suivi pour ces les patients ont varié de mois à & gt; années Pour le patient, les cultures sont restées persistantes positives pour C krusei malgré la thérapie avec l’acide borique, AmB, clotrimazole, et l’itraconazole, bien que les symptômes aient été supprimés.Génotypage Tous les isolats ont révélé des génotypes typiques de C krusei , avec des bandes chromosomiques à faible poids moléculaire, Les génotypes CK- et CK- étaient les types de souches les plus communs. Les isolats de C krusei chez les patients ont été évalués. des patients, les isolats des échantillons en série n’ont révélé aucun changement dans le génotype pendant le suivi Pour les patients patients, et un changement de génotype identifié dans les isolats vaginaux en série Cependant, les différences dans les modèles étaient mineures et étaient seulement un changement de position de plus que la bande chromosomique Le patient a d’abord montré une infection avec la souche CK-, puis avec la souche CK-, puis à nouveau avec le géno type CK- figure Ainsi, le premier et le dernier isolat avaient des génotypes identiques Pour le patient, des isolats de différents génotypes, CK- et CK-, ont été identifiés séquentiellement Figure Patient a également été séquentiellement infecté avec différents génotypes de C krusei CK-, puis CK- figure

Table View largeTélécharger slideGénotypes caractéristiques des isolats vaginaux Candida kruseiTable View largeTélécharger slideGénotypie des isolats vaginaux Candida krusei

Tableau View largeTélécharger la diapositiveGénotypes et durée du suivi chez les patients atteints de Candida kruseiVaginiteTable Voir grandTélécharger la diapositiveGénotypes et durée du suivi chez les patients atteints de Candida krusei vaginite

Figure Vue largeDisque de téléchargementCaryotypes électrophorétiques d’isolats en série de Candida krusei récupérés chez les patients, et Patients; voies -, patient; voie, patient; voie, Hansenula wingei controlFigure View largeTélécharger des caryotypes électophorétiques électrophorétiques d’isolats en série de Candida krusei récupérés chez les patients,, et Lanes -, Patient; voies -, patient; voie, patient; voie, Hansenula wingei contrôle

Figure Vue largeDisque de téléchargementCaryotypes électrophorétiques d’isolats en série de Candida krusei récupérés chez des patients,,, et des voies -, Patient; voies -, patient; voies -, patient; voie, patient; voie, Hansenula wingei controlFigure View largeTélécharger des caryotypes électophorétiques électrophorétiques d’isolats en série de Candida krusei récupérés chez les patients,,, et Lanes -, Patient; voies -, patient; voies -, patient; voie, patient; voie, Hansenula wingei contrôle

Discussion

En effet, il est possible que ces femmes aient été colonisées dès le début par un isolat de C krusei auquel elles ont été exposées car C krusei est parfois récupéré de l’environnement et résistance intrinsèque au fluconazole, les patients subissent maintenant les conséquences d’être exposés et infectés par un organisme hautement résistant Nous avons également évalué l’utilisation d’antifongiques et / ou de fluconazole comme mécanisme de sélection de C krusei Malheureusement, presque toutes les femmes atteintes de vaginite réfractaire à la clinique de la vaginite avait déjà été exposé à au moins cours de fluconazole et, très souvent, de multiples cours d’azoles topiques Chez les patients atteints de vaginite fongique chronique et récurrente, il ne faut jamais supposer que l’espèce de levure responsable est invariablement vaginite due à C krusei semblent être indiscernables de celles pour vaginite due à d’autres Espèces Candida, une observation qui souligne la nécessité d’obtenir des spécimens vaginaux pour la culture de tous les patients atteints de maladie réfractaire et récurrente En outre, la présence sur les montées humides de blastospores seulement, par opposition aux hyphes, devrait alerter le praticien sur la probabilité accrue de trouver une espèce non albicans de Candida Comme prédit, les isolats de C krusei récupérés chez nos patients se sont avérés être hautement résistants au fluconazole MIC, & gt; μg / mL Les isolats étaient également résistants au miconazole CMI, μg / mL, un des agents antifongiques topiques en vente libre les plus couramment utilisés Les souches vaginales C krusei étaient les plus sensibles au clotrimazole lors des tests de sensibilité in vitro Bien que la caspofungine soit active contre C krusei , elle n’est pas disponible pour une administration orale ou topique, et la Food and Drug Administration des États-Unis ne l’a pas non plus approuvée pour les infections dues aux espèces Candida, le voriconazole et l’itraconazole ayant également démontré une activité antifongique in vitro favorable; cependant, ils ne sont pas disponibles en tant que préparations topiques, ni approuvés par la FDA pour une utilisation systémique chez les patients atteints de vaginite. AmB a également montré une activité in vitro contre les isolats de C krusei Heureusement, AmB peut également être administré en tant que préparation topique. n’a pas été approuvé par la FDA à cette fin. Une thérapie prolongée, non abrégée, avec de l’acide borique topique ou du clotrimazole topique ou un traitement oral avec du kétoconazole ou de l’itraconazole doit être considéré comme un traitement de première ligne pour les patients atteints de kératose les agents doivent également être d’une durée prolongée, habituellement – des semaines, quel que soit l’agent utilisé Malheureusement, ces recommandations sont basées sur une revue rétrospective de notre expérience de traitement clinique; aucune autre donnée n’est actuellement disponible dans la littérature. La nature indolente de la vaginite à krusei et les génotypes identiques d’isolats consécutifs de la majorité des patients suggèrent fortement que l’infection récidivante est due à une rechute vaginale et non à une réinfection. chez les femmes qui présentent une vaginite récidivante due au C. albicans, comme décrit ailleurs Cependant, comment explique-t-on l’apparition consécutive d’un nouveau génotype non identique observé chez les patients de notre population de patients? Compte tenu de la rareté de la colonisation vaginale, la possibilité d’être exposée à et infectée par une souche nouvelle et différente est peu probable. Une théorie possible est que la même souche peut être responsable de toutes les rechutes; cependant, de petites variations peuvent survenir dans le génotype original, peut-être lorsque la souche résidente subit des modifications adaptatives évolutives sous pression antimycosique. Une deuxième possibilité est que ⩾ les souches de C krusei coexistent simultanément dans le vagin et, en raison d’une erreur d’échantillonnage, sur l’échantillon initial, et la deuxième souche a été récupérée lors d’un échantillonnage en série. Une autre possibilité est que la souche infectieuse initiale a été remplacée par une souche non apparentée lors d’un épisode ultérieur de vaginite.En conclusion, il s’agit de la première description détaillée d’une large Une série de patients atteints de vaginite causée par C krusei C krusei devrait être considérée comme une cause de vaginite réfractaire, en particulier chez les femmes blanches plus âgées qui cherchent des soins pour une vaginite chronique et dont les infections répondent mal aux antimycotiques conventionnels. espèces de Candida peuvent être trouvées par microscopie de routine, ce qui révélera souvent o blastospores sur les films humides Il est essentiel d’identifier les espèces de Candida chez tous les patients ayant des infections réfractaires, car l’identification de C krusei influencera la sélection des agents antimycotiques et la durée du traitement. De plus, comme dans la plupart des cas de candidose vulvo-vaginale récurrente, la récurrence est probablement due à des rechutes vaginales avec le même génotype, plutôt qu’à une réinfection avec une nouvelle souche

Reconnaissance

Nous remercions Debbie Leaman pour son aide avec les dossiers médicaux